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Eppendorf 移液器使用技巧與注意事項

更新時間:2025-10-20      點擊次數(shù):105
Eppendorf 移液器使用技巧與注意事項
Eppendorf 移液器(如 Research® plus 系列)憑借高精度、人體工學設計等優(yōu)勢,成為科研實驗的核心工具。但實際操作中,不規(guī)范的使用方法易導致精度下降、設備損耗,甚至影響實驗結果。本文結合 Eppendorf 移液器的技術特性,從精準移液技巧、日常維護保養(yǎng)、安全操作注意事項三個維度,提供可落地的操作指南,幫助科研人員發(fā)揮設備性能,延長使用壽命。
一、精準移液技巧:發(fā)揮 Eppendorf 移液器的精度優(yōu)勢
Eppendorf 移液器的精度(系統(tǒng)誤<±0.5%,隨機誤<0.3%)需通過規(guī)范操作實現(xiàn),不同移液場景(微量、大量、腐蝕性試劑)需適配不同技巧:
(一)微量樣品移液技巧(≤10 μL)
微量移液(如 qPCR 實驗中 0.5-2 μL cDNA 模板移取)對操作精度要求,需注意以下細節(jié):
  1. 槍頭選擇與適配:優(yōu)先使用 Eppendorf 原裝低吸附槍頭(如貨號 0030073124,10 μL 規(guī)格),其內壁經(jīng)特殊硅化處理,液體殘留量<0.1 μL,避免微量樣品損失,需將移液器槍頭錐部對準槍頭管口,輕輕旋轉按壓,確保密封(可聽到 “咔嗒" 聲),避免因密封不嚴導致的體積偏差(偏差可達 2%-3%)。

  1. 吸液與排液速度控制:采用 “慢吸慢排" 原則 —— 吸液時,將按鈕緩慢按至第一停點(量程設定點),等待 1-2 秒(尤其黏稠樣品,如甘油溶液),確保液體吸入槍頭;排液時,先將槍頭貼壁(與容器壁呈 10°-15° 角),緩慢按至第一停點,停留 1 秒后繼續(xù)按至第二停點,排出殘留液體,避免微量樣品殘留(如 0.1 μL 殘留對 1 μL 移液的誤差影響達 10%)。

  1. 量程調節(jié)技巧:調節(jié)量程時,需遵循 “從大到小" 原則(如從 10 μL 調至 2 μL,直接逆時針旋轉旋鈕至 2 μL;若需從 2 μL 調至 10 μL,需先調至 15 μL 再回調至 10 μL),避免旋鈕過度旋轉導致內部齒輪磨損,影響精度。同時,禁止將量程調至超過移液器的最大量程(如 10 μL 移液器調至 11 μL),否則會損壞活塞密封件。

(二)大量樣品移液技巧(≥100 μL)
大量移液(如細胞培養(yǎng)中 100-1000 μL 培養(yǎng)基分裝)需平衡精度與效率,關鍵技巧如下:
  1. 重心控制與姿勢:利用 Eppendorf 移液器的人體工學手柄設計(重心與手指握持點重合),握持時手掌自然貼合手柄,手腕保持水平,避免彎腰或聳肩操作(長期可導致手腕勞損)。移液時,以肘部為支點,帶動手臂移動,而非僅靠手指發(fā)力,減少操作疲勞的同時,確保移液路徑穩(wěn)定,體積偏差<0.5%。

  1. 多通道移液器的一致性控制:使用 Eppendorf 8 通道 / 12 通道移液器(如 Research® plus 8 通道,50-300 μL)時,需確保所有槍頭同時安裝到位(可將移液器垂直扣在槍頭盒上,一次性按壓安裝),避免因個別槍頭密封不嚴導致的通道間偏差(偏差>1%)。移液后,可通過觀察各孔液體高度是否一致,驗證通道一致性,若發(fā)現(xiàn)偏差,及時更換槍頭重新操作。

(三)特殊樣品移液技巧(黏稠、揮發(fā)性、腐蝕性試劑)
針對特殊樣品,需結合 Eppendorf 移液器的抗腐蝕、防污染設計,調整操作方法:
  1. 黏稠樣品(如甘油、蛋白溶液):吸液時,將按鈕按至第二停點(而非第一停點),緩慢吸入樣品,停留 3-5 秒(讓樣品充分流入槍頭),排液時同樣緩慢按至第二停點,避免因樣品黏稠導致的體積不足(傳統(tǒng)操作易導致 10%-15% 的體積偏差)。同時,選擇大口槍頭(如 Eppendorf 1000 μL 大口槍頭),減少樣品流動阻力。

  1. 揮發(fā)性樣品(如乙醇、丙酮):此類樣品易揮發(fā)導致槍頭內壓力變化,需快速完成吸液與排液操作(總時間<5 秒),且排液時確保槍頭接觸液面(避免樣品揮發(fā)后體積減少)。若需多次移取,建議每移取 3-5 次后,重新校準移液器(使用 Eppendorf 校準工具),確保精度。

  1. 腐蝕性試劑(如強酸、強堿):使用 Eppendorf 抗腐蝕移液器(如 Research® plus Corrosion-Resistant 系列),其槍頭錐部采用 1.4404 特種不銹鋼材質,可耐受 98% 硫酸、37% 鹽酸。操作時需佩戴手套,避免試劑接觸移液器主體(若不慎接觸,立即用 70% 乙醇擦拭),且移液后及時更換槍頭,避免試劑殘留腐蝕槍頭錐部。

二、日常維護保養(yǎng):延長 Eppendorf 移液器使用壽命
Eppendorf 移液器的設計使用壽命可達 5 年以上,但需通過規(guī)范的日常維護實現(xiàn),核心維護要點包括:
(一)清潔保養(yǎng):避免污染與腐蝕
  1. 外部清潔:每日實驗結束后,用 70% 乙醇擦拭移液器主體(尤其是手柄、按鈕、槍頭錐部),去除樣品殘留(如蛋白、核酸),避免殘留樣品干燥后堵塞槍頭錐部或腐蝕材質。若接觸過放射性或有毒樣品,需使用專用消毒劑(如含氯消毒劑)擦拭,再用超純水清潔,最后用 70% 乙醇消毒。

  1. 內部清潔與滅菌:若移液器內部被樣品污染(如樣品倒吸進入移液器),需拆解移液器(參照 Eppendorf 拆解指南),用超純水沖洗內部活塞、彈簧等部件,晾干后重新組裝。對于需要無菌操作的場景(如細胞培養(yǎng)),可將移液器槍頭錐部拆下,進行 121℃高壓滅菌(20 分鐘),滅菌后晾干再安裝使用(Eppendorf Research® plus 系列的槍頭錐部支持高壓滅菌,其他部件禁止滅菌)。

(二)精度校準:定期驗證與調整
Eppendorf 移液器的精度會隨使用次數(shù)增加(如 1 萬次以上)逐漸衰減,需定期校準:
  1. 校準周期:普通實驗場景(如常規(guī)移液)每 6 個月校準 1 次;高頻使用(如每日移液 100 次以上)或接觸腐蝕性試劑的場景,每 3 個月校準 1 次。校準需使用 Eppendorf 原裝校準工具(如貨號 0030108556 校準套裝),或委托 Eppendorf 服務團隊進行專業(yè)校準(符合 ISO 8655 標準)。

  1. 簡易校準方法(實驗室自查):使用分析天平(精度 0.01 mg)、超純水(25℃,密度 1 g/mL)進行自查 —— 設定移液器量程(如 100 μL),移取超純水至稱量皿中,記錄重量,重復 5 次,計算平均值與理論值(100 mg)的偏差,若偏差>±1%,需進行專業(yè)校準。

(三)耗材適配:選擇 Eppendorf 原裝耗材
  1. 槍頭適配:優(yōu)先使用 Eppendorf 原裝槍頭,其與移液器槍頭錐部的配合間隙<0.001 mm,確保密封精度,避免因非原裝槍頭的尺寸偏差導致的體積誤差(偏差可達 3%-5%)。上海易匯生物提供 Eppendorf 原裝槍頭的現(xiàn)貨供應,當日下單次日送達,可避免因槍頭短缺導致的實驗中斷。

  1. 濾芯更換:對于配備疏水濾芯的移液器(如 Research® plus 帶濾芯系列),當移取易污染樣品(如病毒、細菌)后,需及時更換濾芯(Eppendorf 原裝濾芯貨號 0030073185),避免樣品進入移液器內部造成交叉污染。建議每移取 50 次污染樣品更換 1 次濾芯,常規(guī)樣品每 3 個月更換 1 次。

三、安全操作注意事項:避免設備損壞與實驗風險
不規(guī)范的操作不僅影響精度,還可能導致移液器損壞或實驗安全風險,需重點關注以下事項:
(一)禁止違規(guī)操作:避免設備損壞
  1. 禁止超量程使用:嚴格按照移液器的量程范圍操作(如 10 μL 移液器禁止移取 11 μL 樣品),超量程會導致內部活塞過度拉伸或壓縮,損壞密封件,影響精度(修復成本可達設備價格的 30%)。

  1. 禁止槍頭未安裝時按壓按鈕,按壓按鈕會導致活塞直接暴露,若有灰塵或雜質進入,會磨損活塞表面,導致密封不良(表現(xiàn)為移液體積偏差突然增大)。

  1. 禁止移液器倒置或傾斜存放:移液后若槍頭內殘留液體,倒置或傾斜存放會導致液體流入移液器內部,腐蝕電路(電動移液器)或彈簧(手動移液器),建議使用 Eppendorf 移液器支架(如貨號 0030122470)垂直存放。

(二)實驗安全注意事項:避免樣品污染與人員傷害
  1. 交叉污染防控:移取不同樣品時,必須更換槍頭,禁止重復使用槍頭(即使移取同一種樣品,也需避免槍頭接觸容器壁后交叉污染)。對于高風險樣品(如病原微生物、有毒試劑),需在生物安全柜內操作,且移液器使用后需進行表面消毒(70% 乙醇擦拭)。

  1. 人員防護:移取腐蝕性、揮發(fā)性試劑時,需佩戴手套、護目鏡,避免試劑接觸皮膚或吸入揮發(fā)氣體。若試劑不慎接觸皮膚,立即用大量清水沖洗,必要時就醫(yī)。

  1. 耗材儲存與管理:Eppendorf 槍頭、濾芯等耗材需存放在干燥、潔凈的環(huán)境中(溫度 15-25℃,相對濕度 30%-60%),避免高溫高濕導致耗材變質(如槍頭內壁硅化層脫落)。上海易匯生物的期貨定制服務可根據(jù)科研周期提前 30-60 天鎖定耗材產(chǎn)能,確保耗材儲存條件穩(wěn)定,避免因耗材變質影響實驗。

四、常見問題排查:快速解決使用中的突發(fā)問題
實驗中若遇到移液精度下降、操作卡頓等問題,可按以下步驟排查:
  1. 移液體積偏差增大

  • 檢查槍頭是否安裝到位(重新安裝并確認密封);

  • 檢查槍頭是否過期或變質(如低吸附槍頭硅化層脫落,可更換新槍頭測試);

  • 檢查移液器是否需要校準(按前文簡易校準方法自查)。

  1. 按鈕按壓卡頓

  • 檢查按鈕是否有樣品殘留(用 70% 乙醇擦拭按鈕與手柄連接處);

  • 檢查內部彈簧是否生銹(若有,需聯(lián)系 Eppendorf 維修,禁止自行拆解)。

  1. 槍頭無法安裝或拆卸

  • 檢查槍頭錐部是否有異物(如槍頭碎片,用鑷子小心取出);

  • 檢查槍頭錐部是否變形(若變形,需更換槍頭錐部,建議由專業(yè)人員操作)。

五、總結:構建 “規(guī)范操作 - 定期維護 - 合規(guī)耗材" 的使用體系
Eppendorf 移液器的性能發(fā)揮與使用壽命,依賴于 “規(guī)范操作技巧 + 定期維護保養(yǎng) + 合規(guī)耗材適配" 的綜合管理:通過精準移液技巧精度優(yōu)勢,通過日常維護延長設備壽命,通過安全操作避免風險。同時,上海易匯生物提供的 Eppendorf 原裝耗材現(xiàn)貨與期貨服務,可確保耗材供應穩(wěn)定,避免因耗材不當導致的設備損耗或實驗誤差。
遵循以上技巧與注意事項,不僅能讓 Eppendorf 移液器始終保持最佳性能,為實驗結果的可靠性提供保障,還能降低設備維修成本,提升科研實驗的效率與安全性。



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